Чому збільшення масляної лінзи більше, ніж збільшення звичайного об’єктива?
Причини, чому бактерії необхідно фіксувати перед фарбуванням у мікробіологічних експериментах:
1: Вбийте клітини та зробіть барвник легким для фарбування.
Друге: змусьте бактерії прилипнути до предметного скла та не легко змиватися водою.
При фіксації сушіть повільно. Якщо ви дійсно хочете прискорити процес, ви можете просушити його кілька разів на відстані над полум'ям спиртівки. Не сушіть скло, щоб воно нагрілося, інакше воно може знищити форму життя бактерій.
Фарбування за Грамом і мікроскопічне спостереження бактерій
Експериментальний принцип
Принцип фарбування за Грамом: різні реакції бактерій на фарбування за Грамом зумовлені різним складом і структурою їх клітинних стінок. Клітинна стінка грампозитивних бактерій складається переважно з мережі пептидогліканів. При обробці етанолом розмір пор сітчастої структури стає меншим через дегідратацію, а проникність зменшується, що призводить до утворення комплексу кристалічний фіолетовий йод. Речовина не легко вимивається і залишається в клітинах. Після знебарвлення і контрфарбування синьо-фіолетовий колір основного барвника ще зберігається. Пептидоглікановий шар клітинної стінки грамнегативних бактерій тонкий і має високий вміст ліпідів. Тому під час знебарвлення ліпіди розчиняються етанолом (або ацетоном), і проникність клітинної стінки збільшується, завдяки чому кристалічний фіолетово-йодний комплекс відносно легко виділяється. Після контрфарбування контрфарбою клітини фарбують червоним кольором контрфарби. Принцип формування зображень під мікроскопом: сучасні звичайні оптичні мікроскопи використовують дві системи лінз, окуляри та лінзи об’єктива, щоб збільшити зображення, тому їх часто називають складними мікроскопами. В оптичній системі мікроскопа характеристики лінзи об’єктива є найбільш критичними. Масляна лінза має найбільше збільшення і є найважливішою для мікробіологічних досліджень. Основна мета додавання крапель олії для лінз між предметним склом і лінзою — збільшити яскравість освітлення та збільшити роздільну здатність мікроскопа. Використання масла замість повітря як середовища розповсюдження світла зменшує заломлення або повне відбиття світла, роблячи спостережене зображення чіткішим.
Знайдіть колонії бактерій, які потрібно спостерігати під мікроскопом із малим збільшенням (продовжуйте рухати предметне скло, якщо ви відчуєте червону тінь, негайно зупиніться, відрегулюйте збільшення, якщо це не колонії, продовжуйте дивитися), підніміть оправу об’єктива. , а потім перейдіть на масляну лінзу. Додайте краплю кедрової олії на ділянку зразка та за допомогою грубого регулятора обережно опустіть оправу лінзи так, щоб масляна лінза була занурена в лінзову олію й майже торкалася зразка. Підніміть конденсор у найвище положення та відкрийте апертуру. Використовуйте грубий регулятор, щоб повільно підняти оправу об’єктива, доки зображення об’єкта не з’явиться в полі зору, і використовуйте точний регулятор, щоб зробити його чітким і сфокусованим.
