Які відмінності між дво-фотонною мікроскопією та лазерною конфокальною мікроскопією?
Лазерний конфокальний мікроскоп — це набір систем спостереження, аналізу та виведення, які використовують лазер як джерело світла, принцип сполученого фокусування та пристрій на основі традиційного оптичного мікроскопа та цифрову обробку зображень спостережуваного об’єкта за допомогою комп’ютера. Основна система включає в себе лазерне джерело світла, автоматичний мікроскоп, скануючий модуль (включаючи конфокальний канал оптичного шляху та точечне отвір, скануюче дзеркало, детектор), цифровий процесор сигналу, комп’ютер та обладнання для виведення зображення (дисплей, кольоровий принтер) тощо. За допомогою лазерного скануючого конфокального мікроскопа можна виконувати томографічне сканування та зображення досліджуваного зразка. Таким чином, можна спостерігати й аналізувати три-просторову структуру клітин без пошкодження.
Між тим, лазерна скануюча конфокальна мікроскопія також є потужним інструментом для динамічного спостереження за живими клітинами, множинного імунофлуоресцентного мічення та спостереження за міткою іонної флуоресценції. Точний аналіз суті спектрів і розрізнення сигналів із спектрами випромінювання, що сильно перекриваються, і різними маркерами.
Найважливішим є те, що для багато{0}}кольорового флуоресцентного фарбування можна повністю усунути вплив флуоресцентного перехресного забарвлення та мінімізувати втрату сигналу флуоресценції зразка якнайбільше. Це все те, чого не можуть досягти звичайні світлові дзеркала.
Який принцип роботи мікроскопа
Принцип роботи мікроскопа полягає в зображенні опуклою лінзою. В оптиці реальним зображенням називається зображення, утворене зближенням реальних світлових променів, які можна представити на світловому екрані. Зображення, утворене зближенням зворотної продовженої лінії світлових променів, яке неможливо представити на світловому екрані, називається віртуальним зображенням. Коли обговорюють різницю між реальними та віртуальними зображеннями, часто згадують, що реальні зображення перевернуті, а віртуальні – вертикальні.
Мікроскоп в основному складається з окуляра, об’єктива, предметного столика та відбивача. Окуляр і об'єктив є опуклими лінзами з різними фокусними відстанями. Фокусна відстань опуклої лінзи об'єктива менша, ніж опуклої лінзи окуляра.
Лінза об’єктива еквівалентна лінзі проектора, і об’єкти інвертуються та збільшуються до реального зображення через лінзу об’єктива. Окуляр еквівалентний звичайному збільшувальному склу, і реальне зображення потім перетворюється на вертикальне та збільшене віртуальне зображення через окуляр. Об’єкти, які досягають людського ока через мікроскоп, стають перевернутими збільшеними віртуальними зображеннями.
