Принципи та структурні характеристики флуоресцентних мікроскопів
Флуоресцентний мікроскоп використовує високоефективне точкове джерело світла для випромінювання світла з певною довжиною хвилі (наприклад, ультрафіолетового світла 3650 або фіолетового синього світла 4200) через систему кольорових фільтрів як збуджуючого світла, яке збуджує флуоресцентні речовини в зразку для випромінювання різних кольорів флуоресценції, а потім спостерігає за допомогою збільшення лінзи об’єктива та окуляра. Таким чином, навіть при слабкій флуоресценції на сильному фоні його легко розпізнати та він має високу чутливість. В основному він використовується для вивчення клітинної структури, функції та хімічного складу. Основна структура флуоресцентного мікроскопа складається зі звичайного оптичного мікроскопа та деяких аксесуарів, таких як флуоресцентне джерело світла, фільтр збудження, подвійний кольоровий світлорозділювач і блокуючий фільтр. Флуоресцентне джерело світла - зазвичай використовує ртутні лампи над-високого тиску (50-200 Вт), які можуть випромінювати світло з різною довжиною хвилі, але кожна флуоресцентна речовина має довжину хвилі збудження, яка створює найсильнішу флуоресценцію. Тому необхідно додати фільтри збудження (зазвичай фільтри збудження ультрафіолетового, фіолетового, синього та зеленого кольорів), щоб пропускати світло збудження лише певної довжини хвилі та опромінювати зразок, поглинаючи все інше світло. Після опромінення збуджуючим світлом кожна речовина випромінює видиму флуоресценцію з довжиною хвилі, більшою за довжину хвилі опромінення, за дуже короткий проміжок часу. Флуоресценція має специфічність і, як правило, слабша, ніж світло збудження. Щоб спостерігати специфічну флуоресценцію, за лінзою об’єктива потрібно додати блокуючий (або пригнічуючий) фільтр.
Його функції подвійні: по-перше, поглинати та блокувати збуджувальне світло від потрапляння в окуляр, щоб уникнути порушення флуоресценції та пошкодження очей; по-друге, для вибору та пропускання певної флуоресценції, демонструючи певний флуоресцентний колір. Два типи фільтрів повинні використовуватися разом.
