Кілька питань у використанні фазово-контрастної мікроскопії:
(1) Зміна фази, коли n '
(2) Ефект ореолу та поступового затемнення в процесі формування зображення фазово-контрастної мікроскопії, коли структура стає темнішою через затримку фази, є не втратою світла, а результатом перерозподілу світла на площині зображення. Тому світло, яке явно зникає в темних областях, буде виглядати як яскраве гало навколо темніших об’єктів. Це є недоліком фазово-контрастної мікроскопії, що ускладнює спостереження тонких структур. Коли кільцева апертура дуже вузька, явище гало більш серйозне. Іншим явищем фазово-контрастної мікроскопії є ефект затемнення, який означає зменшення контрасту на краях більшої області з такою ж затримкою фази, що спостерігається під час спостереження за фазовим контрастом.
(3) Вплив товщини зразка При спостереженні різниці товщина зразка повинна бути 5 мкм або менше. При використанні більш товстих зразків верхній шар зразка буде прозорим, тоді як глибший шар буде розмитим і створюватиме перешкоди зсуву фази та розсіювання світла.
(4) Вплив покривного скла та предметного скла на зразок має бути покритий покривним склом, інакше яскраве кільце кільцевої апертури та темне кільце фазової пластини важко перекривати. Диференціальне спостереження також пред'являє високі вимоги до якості скла предметного та покривного скла. Якщо є подряпини, неоднакова товщина або неоднакова нерівність, це може спричинити спотворення яскравого кільця та фазові перешкоди. Крім того, якщо предметне скло занадто товсте або занадто тонке, це спричинить збільшення або зменшення кільцевої апертури.
В даний час оптичні мікроскопи еволюціонували від традиційних біологічних мікроскопів до різних типів спеціалізованих мікроскопів. За принципом зображення їх можна розділити на:
① Геометричний оптичний мікроскоп: включаючи біологічний мікроскоп, мікроскоп падаючого світла, інвертований мікроскоп, металографічний мікроскоп, мікроскоп темного поля тощо.
② Фізичний оптичний мікроскоп: включаючи фазово-контрастний мікроскоп, поляризаційний мікроскоп, інтерференційний мікроскоп, фазово-контрастний поляризаційний мікроскоп, фазово-контрастний інтерференційний мікроскоп, фазово-контрастний флуоресцентний мікроскоп тощо.
③ Мікроскопи для перетворення інформації: включаючи флуоресцентні мікроскопи, мікроспектрометри, мікроскопи аналізу зображень, акустичні мікроскопи, фотографічні мікроскопи, телевізійні мікроскопи тощо.
Перелічіть кілька способів використання мікроскопів: a Біологічний мікроскоп: загалом мікроскопи можна розділити на стереомікроскопи та біологічні мікроскопи. Через різні цілі та вимоги виникло багато гілок, але основні принципи залишаються незмінними. Поляризація, фазовий контраст, пропускання та падаюче світло все ще класифікуються як біологічні мікроскопи. Стереоскопічний мікроскоп, також відомий як анатомічний мікроскоп, твердотільний мікроскоп і стереомікроскоп, є універсальним мікроскопом. Він простий в експлуатації, має низькі вимоги до зразків, має велику робочу відстань і має сильне відчуття тривимірності під час спостереження. Його можна використовувати для спостереження за фізичними об’єктами або виконання деяких операцій над зразками під час спостереження. Замість розрізання зразка, як у біологічному мікроскопі, розрізання вимагає відповідної технології та обладнання. Таким чином, стереомікроскопи мають широкий спектр застосування в таких галузях, як мікроелектроніка, збірка та обслуговування точних інструментів, а також мікрогравірування. Широко використовуються в анатомії та мікрохірургії в галузях біології та медицини (наразі класифікуються як хірургічні мікроскопи), джерелом світла, що використовується в біології та медицині, може бути лише джерело холодного світла (волоконна оптика); Використовується в промисловості для спостереження, складання, перевірки та інших робіт з малими деталями та інтегральними схемами. Металографічний мікроскоп: багато людей люблять писати це як "металографічний мікроскоп". Металографічний мікроскоп — це мікроскоп, який спеціально використовується для спостереження за металографічною структурою непрозорих об’єктів, таких як метали та мінерали. Ці непрозорі об’єкти не можна спостерігати у звичайному мікроскопі, що пропускає, тому основна відмінність між ними та звичайним мікроскопом полягає в тому, що перший використовує відбите світло, тоді як другий використовує світло, що проходить для освітлення. У металографічному мікроскопі промінь освітлення направляється від лінзи об’єктива до поверхні спостережуваного об’єкта, відбивається поверхнею, а потім повертається до лінзи об’єктива для отримання зображення. Цей метод відбивного освітлення також широко використовується для виявлення кремнієвих пластин інтегральних схем.
