Методи підготовки зразків для оптичної та електронної мікроскопії плівок
Метод мікрофільмування зазвичай включає чотири категорії: метод розділення, метод загального запечатування, метод покриття та метод пресування.
①Метод зрізу. Товщина зрізу оптичного мікроскопа від 2 до 25 мікрон, звичайні рослинні та тваринні матеріали, зріз має товщину приблизно 10 мікрон. Метод розділення залежить від різних агентів вбудовування. Зазвичай використовуються парафіновий метод розділення, метод розділення бавовняного клею, метод замороженого розділення та метод глікольметакрилату (називається методом GMA). Метод розділення парафіном включає етапи фіксації, заливання, розділення, фарбування, дегідратації та запечатування. Головне – залити біоматеріал у парафін і використовувати парафін як опору для нарізання біоматеріалу, зануреного у восковий блок, на ідеальні тонкі скибочки. Операційний процес виглядає наступним чином: фіксація → промивання водою → покрокова дегідратація алкоголю від низької до високої концентрації → прозорість ксилолу → занурення воску → вбудовування → розділення → латання → депарафінізація ксилолом → покрокова від високої до низької концентрації обробка спиртом і, нарешті, перехід до води → фарбування → поетапне зневоднення спирту з низькою концентрацією до високої → прозорість ксилолу → запечатування смоляним клеєм. Основні кроки однакові в усіх видах техніки створення фільму.
② Інтегральний метод ущільнення. Використовується для окремих клітин, крихітних організмів або диспергованих органів цілого методу змонтованої плівки. Цей метод також вимагає різних етапів фіксації, фарбування, зневоднення, прозорості та запечатування. Цей спосіб використовують для приготування ротового апарату мереживонів і комах.
Метод мазка. Метод підготовки, при якому біологічний зразок, що легко диспергується, наноситься на предметне скло. Прикладом є мазок крові.
④Метод пресування. Природні, легко дисперговані тканини або легко дисперговані тканини після обробки, такі як сперматоцити тварин, клітини кінчиків коренів тощо на предметному склі, а також накривне скельце, а потім сильно розчавлюють тканини, щоб клітини або внутрішньоклітинні структури поширилися в шар. методів зйомки. Метод пресування часто використовується для спостереження за хромосомами, зазвичай забарвленими пурпуровим ацетатом, червоним лишайником і червоним карболовою кислотою.
