Вимірювання об'єму тканинного блоку за допомогою біологічних мікроскопів
Наразі кріофіксація, заморожені над-тонкі зрізи та-сушіння заморожуванням є звичайними методами рентгенівської -мікроскопії тканин і клітин. Будь ласка, надайте такі відомості щодо цього методу:
Біологічний мікроскоп із прожектором може переміщувати прожектор вгору та вниз для досягнення помірної яскравості, а діафрагму змінної діафрагми також можна змінити для досягнення помірної яскравості. Якщо світло походить від сонця, прожектор можна підняти належним чином, а діафрагму змінного світла можна відповідно збільшити. Якщо світло занадто сильне, прожектор можна відповідно опустити, а апертуру перехрестя можна відповідно зменшити. Якщо ви все ще відчуваєте себе сліпучим у цій ситуації, ви можете вибрати відповідний фільтр на кронштейні під прожектором. Цей дуб може досягти яскравості, яка вас задовольняє. Звичайно, регулюючи верхнє та нижнє положення прожектора, можна змінити розмір діафрагми світлового зчитування та вибрати відповідні фільтри, що вимагає певного періоду практики та досвіду.
Дуже важливим питанням у біологічній мікроскопії є процес відбору та виділення клітин. Після-сушіння заморожуванням і заливання смоли (FD) заморожені ультра{2}}зрізи необхідно ретельно обробити, щоб гарантувати, що вміст 65 елементів кожної частини не буде пошкоджено під час спостереження та аналізу. Через численні кроки та високу вартість рентгенівського мікроаналізу, прикро робити неправильні висновки, якщо проаналізовані клітини пошкоджені або мертві після тривалої та багато-етапної обробки. Клітини міокарда, відокремлені обробкою желатиназою, мають дві форми: одна має довгу паличкоподібну форму, а друга — круглу. Останнє стосується відмираючих клітин, які пошкоджуються під час процесу поділу клітин.
Вміст і розподіл електролітів у цих двох типах клітин дуже відрізняються під біологічним мікроскопом. У циркулярних кардіоміоцитах Na дуже високий, а K надзвичайно низький, а в лінійних дендритах концентрація Ca дуже висока. Після перевірки за допомогою інших аналітичних методів було доведено, що високий Na та низький K у циркулярних клітинах і високий Ca у мітохондріях є результатом пошкодження мембрани під час відділення клітин. Метод холодної фіксації клітин і тканин часто включає спочатку загартування, а потім зберігання в рідкому азоті. Гартівна фіксація має вирішальне значення для ефекту збереження. Живі клітини або свіжі тканини багаті водою, і під час гасіння частини клітин або тканин, які вступають у безпосередній контакт з холодоагентом (особливо при використанні рідкого азоту для охолодження), часто спочатку заморожують і фіксують, утворюючи «оболонку», яка перешкоджає роздавленню та фіксації центральної частини клітин. Тому при проведенні рентгенівського мікроаналізу часто виявляється, що кристали льоду існують у центральній частині більших клітин. Щоб запобігти цій ситуації, як холодоагент використовується речовина з температурою плавлення, вищою за рідкий азот, але нижчою на 806C. Цих речовин багато, але їх легко отримати і найдоступнішим є концентрований пропан (температура кипіння 42,120C, температура плавлення 187,10C, молекулярна маса 44,1), який також має швидку швидкість охолодження. Але його недолік в тому, що він горючий.
