Лазерний конфокальний мікроскоп. Принцип дії
Лазерна конфокальна мікроскопія заснована на отриманні зображень під флуоресцентним мікроскопом із додаванням лазерного скануючого пристрою, використанням комп’ютерної обробки зображень, роздільною здатністю оптичного зображення, збільшеною на 30% - 40%, використанням збудження ультрафіолетового або видимого світла флуоресцентних ламп зонди, щоб отримати флуоресцентне зображення внутрішньої мікроструктури клітин або тканин, на субклітинному рівні для спостереження за фізіологічними сигналами та змінами клітинної морфології, такими як Ca2+, PH, мембранний потенціал тощо, стало нове покоління потужних дослідницьких інструментів у морфології, молекулярній біології, нейронауці, фармакології, генетиці та інших галузях. Лазерна система конфокальної візуалізації — це потужне нове покоління дослідницьких інструментів у галузях морфології, молекулярної біології, нейронаук, фармакології, генетики тощо. Лазерну систему конфокальної візуалізації можна використовувати для спостереження за різними пофарбованими, незабарвленими та флуоресцентно міченими тканинами та клітинами тощо, для спостереження та вивчення росту та розвитку зрізів тканини та клітин in vivo, а також для вивчення та вимірювання внутрішньоклітинних транспорт речовин і перетворення енергії. Він здатний проводити дослідження змін іонів і рН у живих клітинах (RATIO), дослідження нейромедіаторів, диференціальну інтерференцію та флуоресцентну томографію, множинну флуоресцентну томографію та перекривання, флуоресцентну спектроскопію, аналіз показників флуоресценції, кількісний аналіз зразків флуоресценції часу- сповільнене сканування та динамічні компоненти тривимірної динамічної структури тканин і клітин, аналіз передачі резонансної енергії флуоресценції, дослідження гібридизації флуоресценції in situ (FISH), дослідження цитоскелета (FISH), дослідження цитоскелета. FISH), дослідження цитоскелету, дослідження локалізації генів, аналіз продуктів ПЛР in situ в режимі реального часу, дослідження відновлення флуоресцентного відбілювання (FRAP), дослідження міжклітинного зв’язку, дослідження між білками, дослідження мембранного потенціалу та текучості мембран тощо, щоб завершити аналіз аналізу зображень і тривимірної реконструкції та інші аналізи.
Області застосування системи лазерного конфокального мікроскопа:
Залучення медицини, наукових досліджень тварин і рослин, біохімії, **ології, клітинної біології, ембріональних тканин, харчових наук, генетики, фармакології, фізіології, оптики, патології, ботаніки, нейронауки, морської біології, матеріалознавства, електроніки, механіки, нафти геологія, мінералогія.
Основні принципи
Традиційний оптичний мікроскоп використовує польове джерело світла, зображення кожної точки на зразку буде заважати дифракцією або розсіюванням світла від сусідніх точок; лазерний конфокальний мікроскоп використовує лазерний промінь через освітлювальний отвір, щоб сформувати точкове джерело світла для сканування кожної точки на фокальній площині зразка, опромінена точка на зразку буде зображена в отворі виявлення, а потім буде прийнята точку виявлення після точково-розмножувальної трубки (ФЕУ) або пристрою холодної електрозв’язки (cCCD), точку за точкою або лінію за лінією, а потім швидко відображати на моніторі комп’ютера. Флуоресцентне зображення, отримане точково або рядково PMT або cCCD за отвором зонда, швидко формується на екрані монітора комп’ютера. Освітлювальний отвір і отвір виявлення спряжені відносно фокальної площини лінзи об’єктива, точки на фокальній площині одночасно сфокусовані на отворі для освітлення та випромінюванні, а точки за межами фокальної площини не будуть зображення в отворі виявлення, так що конфокальне зображення є оптичним поперечним перерізом зразка, що усуває недолік нечіткого зображення звичайного мікроскопа.
Лазерний конфокальний мікроскоп Принцип роботи
