Як вибрати між інвертованим мікроскопом і флуоресцентним мікроскопом?
Мікроскоп є важливим інструментом у культурі клітин і пов’язаних експериментах із похідними. Зараз на ринку є різні типи мікроскопів, і вибрати мікроскоп, який відповідає потребам і підходить, є проблемою. Нижче ми представимо принципи інвертованих мікроскопів і флуоресцентних мікроскопів для кожного на вибір.
Інвертований мікроскоп, як і звичайний мікроскоп, в основному складається з трьох частин: механічної частини, освітлювальної частини та оптичної частини. Композиція інвертованого мікроскопа така ж, як і звичайного вертикального мікроскопа, за винятком того, що лінза об’єктива та система освітлення перевернуті: перша під предметним столиком, а друга – над предметним столиком. Ця конструкція значно збільшує ефективну відстань між системою прожекторів освітлення та сценою, полегшуючи розміщення більш товстих інструментів для спостереження, таких як культуральні чашки та пляшки для клітинних культур (звичайно, також можна використовувати предметні скла), а робоча відстань між лінза об’єктива та матеріал не повинні бути дуже великими. Інвертований мікроскоп використовується медичними та медичними установами, університетами та науково-дослідними інститутами для спостереження за мікроорганізмами, клітинами, бактеріями, культурами тканин, суспензіями, осадами тощо. Він може безперервно спостерігати процес клітинної та бактеріальної проліферації та поділу в культуральному середовищі, а також може охопити будь-яку форму цього процесу. Широко використовується в таких галузях, як цитологія, паразитологія, онкологія, імунологія, генна інженерія, промислова мікробіологія та ботаніка.
Флуоресцентна мікроскопія використовується для вивчення поглинання, транспортування, розподілу та локалізації речовин у клітинах. Для досліджуваного об'єкта існує два способи генерації флуоресценції: спонтанна флуоресценція, яка безпосередньо випромінюється ультрафіолетовим опроміненням; Вторинна флуоресценція виникає, коли досліджуваний об’єкт обробляють флуоресцентними барвниками та піддають ультрафіолетовому світлу перед випромінюванням флуоресценції. Деякі речовини в клітинах, наприклад хлорофіл, виробляють спонтанну флуоресценцію після впливу ультрафіолетового випромінювання; Деякі речовини самі по собі можуть не випромінювати флуоресценцію, але якщо їх пофарбувати флуоресцентними барвниками або флуоресцентними антитілами, вони також можуть випромінювати вторинну флуоресценцію під ультрафіолетовим випромінюванням. Флуоресцентний мікроскоп використовує точкове джерело світла високої світлової ефективності для випромінювання світла з певною довжиною хвилі (УФ 365 нм або УФ синій 420 нм) через систему колірної фільтрації як збуджувальне світло, яке збуджує флуоресцентні речовини у зразку для випромінювання різних кольорів флуоресценції. Після цього спостерігають за допомогою збільшення об’єктива та окуляра. Таким чином, навіть зі слабкою флуоресценцією, він легко розпізнається та має високу чутливість на сильному контрастному фоні. В основному він використовується для вивчення будови, функції та хімічного складу клітин.
Флуоресцентну мікроскопію можна розділити на два типи: трансмісійний тип і тип падіння. Перший більш примітивний, а другий більш досконалий. Основна конструкція обох типів флуоресцентних мікроскопів подібна, головна відмінність полягає в тому, що передане світло збудження проходить через зразок, створюючи флуоресценцію в цілому. Потім флуоресценція потрапляє в лінзу об’єктива, і чим більше збільшення, тим слабша флуоресценція; Падаюче збуджувальне світло проектується на поверхню зразка, створюючи флуоресценцію, яка потрапляє в лінзу об’єктива. Чим вище збільшення, тим сильніша флуоресценція, що робить його придатним для спостереження з високою потужністю. Основні компоненти флуоресцентного мікроскопа включають джерело світла ртутної лампи, пластину фільтра збудження, спектрофотометр (тип краплі), пластину фільтра для придушення та конденсор темного поля (тип пропускання). Крім того, через сильний нагрів ртутних ламп більшість з них також оснащені теплопоглинаючими фільтрами. Деякі флуоресцентні мікроскопи також мають об’єктив з фазовим контрастом і круглу апертуру, що дозволяє спостерігати за фазовим контрастом. Деякі флуоресцентні мікроскопи мають інвертовану структуру, яка також є інвертованим мікроскопом тощо.
Крім того, вищезазначені мікроскопи можна зібрати в цифрові мікроскопи, встановивши CCD, який перетворює фізичні зображення, які бачить мікроскоп, у цифрові аналогові зображення та відображає їх на комп’ютері. У результаті ми можемо перенести наші дослідження в мікросфері від традиційного бінокулярного спостереження до відтворення за допомогою дисплеїв, тим самим покращуючи ефективність роботи.
