Як налаштувати інтенсивність лазерного випромінювання лазерного скануючого конфокального мікроскопа
Є два коефіцієнти регулювання інтенсивності лазера: ручка керування потужністю та акусто-оптичний регульований фільтр (AOTF)
1. Ручка керування потужністю: зазвичай встановлено на 30% від максимального значення. Збільшення вихідної потужності скоротить термін служби лазера та створить лазерний шум. Для отримання найкращої інтенсивності спочатку слід налаштувати AOTF, PMT тощо.
2. Регульований акустооптичний фільтр: контролює світловий промінь збудження та інтенсивність і може вмикати чи вимикати лазер або регулювати його в межах 0-100% протягом мілісекунд. Це дозволяє використовувати різні лазерні промені для кожної точки зображення та вибирати необхідну інтенсивність.
Принцип роботи: він використовує дифракційний ефект Брегга звукових хвиль, що поширюються в різних середовищах, на падаючу дифракцію Брегга в середовищі розповсюдження. Коли на вхід надходить радіочастотний сигнал певної частоти, AOTF дифрагує падаюче поліхроматичне світло та вибирає монохроматичне світло з довжиною хвилі вхідного сигналу. Довжина хвилі монохроматичного світла відповідає один--одному радіочастотній частоті f. Поки електричний сигнал налаштований, вихідну довжину хвилі можна швидко та випадково змінювати. AOTF забезпечує безперервне регулювання інтенсивності лазера та має функцію швидкого налаштування, реалізуючи локальну стимуляцію та сканування, швидке перемикання довжини хвилі (мікросекундний рівень). У лазерній конфокальній мікроскопії фотопомножувачі не можуть підвищити інтенсивність лазера, але можуть регулювати інтенсивність світла після візуалізації. Тому, регулюючи напругу фотоелектронного помножувача, можна регулювати яскравість зображення. Крім того, розмір фокального отвору впливає на кількість фотонів, а також може регулювати яскравість зображення. Фотоелектронний помножувач – це спеціальна вакуумна трубка, надзвичайно чутлива до ультрафіолетового, видимого та ближнього{10}}інфрачервоного світла. Він може посилити вхідний слабкий світловий сигнал у 108 разів, дозволяючи виміряти світловий сигнал.
