Wprowadzenie do Zalet I wad wielofotonowej mikroskopii skaningowej laserowej
Переваги багатофотонного лазерного сканування мікроскопа:
1. З збудженим червоним або інфрачервоним світлом, розсіювання світла невелике, а розсіювання дрібних частинок обернено пропорційно четвертому силі довжини хвилі.
2. Більше розсіяних фотонів від поперечного перерізу візуалізації можна зібрати без необхідності в горіхах.
3. Пінтоли не можуть розрізнити розсіяні фотони, випромінювані від розлучених або фокусних областей, а багатофотони мають краще співвідношення сигнал-шум у глибокій візуалізації.
4. Ультрафіолетове або видиме світло, що використовується для одного фотонного збудження, легко засвоюється та ослаблена зразком до того, як промінь досягне фокусної площини, що ускладнює збудження глибоких шарів.
5. З точки зору спостереження за біологічною мікроскопією, перше врахування полягає в тому, щоб не пошкодити активний стан самого організму, підтримувати циркуляцію води, концентрації іонів, кисню та поживних речовин. У галузі спостереження світла як теплова, так і фотонна енергія повинна залишатися в дозі опромінення та легкої енергії, які не пошкоджують клітини.
6. Багатофотонна мікроскопія має багато переваг. З точки зору тривимірної роздільної здатності, інвазії глибини, ефективності розсіювання, фонового світла, співвідношення сигнал-шум, контролю тощо, є характеристики, якими попередні лазерні мікроскопи не володіють або не можуть перевершити
Недоліки багатофотонного лазерного скануючого мікроскопа:
1. Тільки для зображення флуоресценції.
2. Якщо зразок включає хромофори, які можуть поглинати світло збудження, зразок може зазнати теплового пошкодження.
3. Роздільна здатність трохи зменшується, хоча її можна покращити, одночасно використовуючи конфокальні невеликі отвори, відбувається втрата сигналу.
4. Через обмеження дорогих ультрашвидких лазерів вартість багатофотонних скануючих мікроскопів відносно висока.
