Що таке темнопольна мікроскопія? Наскільки маленькою можна побачити клітинку?
Темнопольний мікроскоп — це різновид оптичного мікроскопа, який також називають ультрамікроскопом. У центрі конденсора темнопольного мікроскопа є світлозахисний екран, щоб освітлювальне світло не потрапляло безпосередньо в лінзу людини. В лінзу об’єктива потрапляє лише світло, відбите та дифраговане зразком. Тому фон поля зору чорний, а краї об’єктів світлі. з. Цей вид мікроскопа може бачити частинки розміром 4~200 нм, а роздільна здатність може бути в 50 разів вищою, ніж у звичайних мікроскопів.
принцип
Темнопольний мікроскоп модифікований на основі структури звичайного оптичного мікроскопа з використанням принципу оптичного ефекту Тиндаля. Темнопольні конденсатори дозволяють блокувати центральний промінь джерела світла. Неможливо потрапити в об’єктив через зразок знизу вгору. У результаті світло змінює свій шлях і випромінює похило на досліджуваний зразок. Зразок відбивається або розсіюється під час зустрічі зі світлом. Розсіяне світло потрапляє на лінзу об’єктива, тому все поле зору темне.
Основним принципом темнопольної мікроскопії є ефект Тиндаля. Коли промінь світла проходить крізь темну кімнату, у повітрі можна спостерігати яскраву пилову «доріжку» з напрямку, перпендикулярного падаючому світлу. Це явище є ефектом Тиндаля. Після заміни темнопольного мікроскопа на темнопольний конденсор у звичайному оптичному мікроскопі через оклюзію внутрішньої параболічної структури конденсора світло, що випромінює поверхню досліджуваного об’єкта, не може безпосередньо потрапити в об’єктив. об’єктива та окуляра, через що може проходити лише розсіяне світло, що зменшує поле зору. темно. Оскільки темнопольний мікроскоп не випромінює прозоре світло в систему прямого спостереження, коли немає об'єкта, поле зору темне, і неможливо спостерігати будь-який об'єкт; коли є об’єкт, світло, що дифрагує об’єкт, і розсіяне світло яскраво видно на темному тлі. . При спостереженні об'єкта в темному полі більша частина освітленого світла заломлюється. Внаслідок розташування, структури та товщини об’єкта (зразка) розсіювання та заломлення світла сильно змінюються.
Будова та модифікація
Основна структура темнопольного мікроскопа - це звичайний оптичний набір мікроскопа плюс світловий бар'єр. Звичайний мікроскоп можна перетворити на мікроскоп темного поля, якщо конденсор є знімним, а діаметр кронштейна підходить для встановлення конденсора темного поля. Якщо конденсора темного поля немає, можна використати щільний чорний папір, щоб зробити центральний світлозахисний екран і розмістити його на рамці фільтра під конденсором звичайного мікроскопа, щоб отримати ефект темного поля. Світловий екран використовується для блокування світла в середині джерела світла, щоб світло могло проникати в зразок лише з навколишнього середовища. Розмір приблизно такий же, як і розмір діафрагми. Для різних збільшень використовуються різні отвори, тому потрібно створювати різні світлові блоки.
Практичне застосування
Темнопольна мікроскопія часто використовується для спостереження за незабарвленими прозорими зразками. Оскільки ці зразки мають показник заломлення, подібний до показника навколишнього середовища, їх важко чітко побачити в умовах звичайного світлого поля. Тому умови темного поля використовуються для покращення контрасту між самим зразком і фоном. Цей вид мікроскопа може бачити частинки розміром від 4 до 200 нм. Він може бачити лише існування, рух і характеристики поверхні об’єкта, але не може розрізнити тонку структуру об’єкта. Клінічно темнопольна мікроскопія зазвичай використовується для дослідження блідих спірохет. Це тест на збудника, який має велике значення для діагностики раннього сифілісу.
