Які відмінності між флуоресцентною мікроскопією та інвертованою мікроскопією
Мікроскоп є важливим інструментом у культурі клітин і пов’язаних експериментах із похідними. Зараз на ринку є різні типи мікроскопів, і вибрати мікроскоп, який відповідає потребам і підходить, є проблемою. Нижче ми представимо принципи інвертованих мікроскопів і флуоресцентних мікроскопів для кожного на вибір.
Інвертований мікроскоп, як і звичайний мікроскоп, в основному складається з трьох частин: механічної частини, освітлювальної частини та оптичної частини.
Композиція інвертованого мікроскопа така ж, як і звичайного вертикального мікроскопа, за винятком того, що лінза об’єктива та система освітлення перевернуті: перша під предметним столиком, а друга – над предметним столиком.
Ця конструкція значно збільшує ефективну відстань між системою прожекторів освітлення та сценою, полегшуючи розміщення більш товстих інструментів для спостереження, таких як культуральні чашки та пляшки для клітинних культур (звичайно, також можна використовувати предметні скла), а робоча відстань між лінза об’єктива та матеріал не повинні бути дуже великими.
Інвертований мікроскоп використовується медичними та медичними установами, університетами та науково-дослідними інститутами для спостереження за мікроорганізмами, клітинами, бактеріями, культурами тканин, суспензіями, осадами тощо. Він може безперервно спостерігати процес клітинної та бактеріальної проліферації та поділу в культуральному середовищі, а також може охопити будь-яку форму цього процесу.
Широко використовується в таких галузях, як цитологія, паразитологія, онкологія, імунологія, генна інженерія, промислова мікробіологія та ботаніка.
Флуоресцентна мікроскопія використовується для вивчення поглинання, транспортування, розподілу та локалізації речовин у клітинах.
Для досліджуваного об'єкта існує два способи генерації флуоресценції: спонтанна флуоресценція, яка безпосередньо випромінюється ультрафіолетовим опроміненням; Вторинна флуоресценція виникає, коли досліджуваний об’єкт обробляють флуоресцентними барвниками та піддають ультрафіолетовому світлу перед випромінюванням флуоресценції.
Деякі речовини в клітинах, наприклад хлорофіл, виробляють спонтанну флуоресценцію після впливу ультрафіолетового випромінювання; Деякі речовини самі по собі можуть не випромінювати флуоресценцію, але якщо їх пофарбувати флуоресцентними барвниками або флуоресцентними антитілами, вони також можуть випромінювати вторинну флуоресценцію під ультрафіолетовим випромінюванням.
Флуоресцентний мікроскоп використовує точкове джерело світла високої світлової ефективності для випромінювання світла з певною довжиною хвилі (УФ 365 нм або УФ синій 420 нм) через систему колірної фільтрації як збуджувальне світло, яке збуджує флуоресцентні речовини у зразку для випромінювання різних кольорів флуоресценції. Після цього спостерігають за допомогою збільшення об’єктива та окуляра.
Таким чином, навіть зі слабкою флуоресценцією, він легко розпізнається та має високу чутливість на сильному контрастному фоні. В основному він використовується для вивчення будови, функції та хімічного складу клітин.
