Флуоресцентні мікроскопи бувають двох типів залежно від оптичного шляху:
1. Трансмісійний флуоресцентний мікроскоп: джерело збудження світла проходить через дзеркало конденсатора через матеріал зразка для стимулювання флуоресценції. Зазвичай використовуваний темнопольний колектор, також можна використовувати звичайний колектор, налаштуйте відбивач так, щоб світло збудження проходило в обхід зразка. Це старіший тип флуоресцентного мікроскопа. Перевагою є те, що флуоресценція сильна при малому збільшенні, а недоліком є те, що флуоресценція слабшає зі збільшенням збільшення. Тому краще спостерігати за більшим матеріалом зразка.
2. Флуоресцентний мікроскоп спадаючого типу. Це новий тип флуоресцентного мікроскопа, розроблений останнім часом, відмінність якого полягає в тому, що збудження світла від лінзи об’єктива до поверхні зразка, тобто тієї самої лінзи об’єктива, що й підсвічування концентратора і збір флуоресцентної лінзи об'єктива. Оптичний шлях потрібно додати до двоколірного розділювача пучка, який знаходиться під кутом 45 до світлого урану, світло збудження відбивається в лінзі об’єктива, і збирається в зразку, флуоресценція, створена зразком і об’єктивом. Поверхня лінзи лінзи, скляна поверхня покриття одночасно відбиває світло збудження в лінзу об’єктива та назад до двоколірного розділювача променя, щоб світло збудження та флуоресценція відокремлювалися від залишкового світла збудження, а потім поглиналися блокувальні фільтри. Якщо ви змінюєте комбінований блок фільтра збудження / двоколірного розділювача променя / блокуючого фільтра, це може задовольнити потреби різних продуктів реакції флуоресценції. Перевагами цього флуоресцентного мікроскопа є поле зору рівномірного освітлення, чітке зображення, чим більше збільшення, тим сильніше флуоресценція.
(B) метод флуоресцентного мікроскопа.
1. Відкрийте джерело світла, ртутну лампу надвисокого тиску, щоб попередньо нагріти її протягом кількох хвилин, щоб досягти найяскравішої точки.
2. Трансмісійний флуоресцентний мікроскоп необхідно встановити між джерелом світла та концентратором, необхідним для стимуляції фільтра, у задній частині лінзи об’єктива з відповідним блокуючим фільтром. Падаючу флуоресцентну мікроскопію необхідно вставити в гніздо оптичного шляху необхідного фільтра збудження / двоколірного розділювача пучка / вставок блокуючого фільтра.
3. Спостерігайте за допомогою об’єктива з малим збільшенням і відрегулюйте центр джерела світла так, щоб він знаходився в центрі всієї плями освітлення відповідно до пристрою регулювання різних моделей флуоресцентних мікроскопів.
4. Помістіть зріз зразка, можна спостерігати за фокусуванням. Використовуйте слід звернути увагу на: кінець встановлення фільтрів не використовуйте око, щоб спостерігати безпосередньо, щоб не спричинити пошкодження очей; з масляним дзеркалом для спостереження за зразком необхідно використовувати спеціальне нефлуоресцентне масляне дзеркало; Ртутну лампу високого тиску не можна знову відкривати відразу після закриття лампи, вам потрібно 5 хвилин, перш ніж ви зможете почати знову, інакше вона буде нестабільною, що вплине на термін служби ртутної лампи.
(C) Спостереження Під флуоресцентним мікроскопом на столику навчання з синьо-фіолетовим світлофільтром можна побачити клітини, пофарбовані 0,01% флуоресцентного барвника амідину помаранчевого кольору, і ядро та цитоплазма клітин збуджені для виробництва двох різних кольори флуоресценції (темно-зелений і оранжево-червоний).
