Існує два типи флуоресцентних мікроскопів залежно від їх світлового шляху.
1. Трансмісійний флуоресцентний мікроскоп: джерело збудження світла проходить через матеріал зразка через конденсор для збудження флуоресценції. Зазвичай використовується темнопольний колектор або можна використовувати звичайний колектор, а рефлектор регулюється так, щоб відводити та випромінювати світло збудження на зразок. Це старіший флуоресцентний мікроскоп. Перевагою є те, що флуоресценція є сильною при малому збільшенні, але недоліком є те, що флуоресценція слабшає зі збільшенням збільшення. Тому краще спостерігати за більшими матеріалами зразків.
2. Епіфлуоресцентний мікроскоп - це новий тип флуоресцентного мікроскопа, розроблений у наш час. Відмінність від вищезазначеного полягає в тому, що збуджуюче світло падає вниз від лінзи об’єктива до поверхні зразка, тобто в якості освітлювального конденсора та лінзи об’єктива для збору флуоресценції використовується та сама лінза об’єктива. До оптичного тракту потрібно додати двоколірний світлорозділювач, який становить 45% з оптичним ураном. Під кутом збудження світло відбивається в лінзу об'єктива і концентрується на зразку. Флуоресценція, що генерується зразком, і світло збудження, відбите поверхнею лінзи об’єктива та поверхнею покривного скла, одночасно надходять в лінзу об’єктива та повертаються до дихроматичного розсіювача променя, так що світло збудження, відокремлене від флуоресценції, залишкове збудження світло потім поглинається блокуючим фільтром. Якщо ви використовуєте різні комбіновані вставки фільтра збудження/двоколірного світлорозділювача/блокуючого фільтра, ви можете задовольнити потреби в різних продуктах реакції флуоресценції. Перевага цього виду флуоресцентного мікроскопа в тому, що поле зору рівномірно освітлене, зображення чітке, і чим більше збільшення, тим сильніше флуоресценція.
(2) Як користуватися флуоресцентним мікроскопом.
1. Увімкніть джерело світла, і ртутна лампа надвисокого тиску повинна прогрітися протягом кількох хвилин, щоб досягти найяскравішої точки.
2. Просвічуючі флуоресцентні мікроскопи вимагають встановлення необхідного фільтра збудження між джерелом світла та конденсором, а також встановлення відповідного блокуючого фільтра за лінзою об’єктива. Епіфлуоресцентні мікроскопи повинні вставити необхідний фільтр збудження/двоколірний світлорозділювач/вставку блокуючого фільтра в отвір шляху світла.
3. Використовуйте мікроскоп з малим збільшенням для спостереження та відрегулюйте центр джерела світла відповідно до пристроїв налаштування різних моделей флуоресцентних мікроскопів так, щоб він знаходився в центрі всієї плями освітлення.
4. Розмістіть зразок і налаштуйте фокус для спостереження. Будь ласка, зверніть увагу під час використання: Не дивіться на фільтр безпосередньо очима, щоб уникнути пошкодження очей; при спостереженні препарату в масляну лінзу необхідно використовувати спеціальну нефлуоресцентну масляну лінзу; ртутну лампу високого тиску не можна знову відкривати одразу після її вимкнення. Його можна запустити знову через 5 хвилин, інакше він буде нестабільним і вплине на термін служби ртутної лампи.
(3) Спостерігайте під флуоресцентним мікроскопом на навчальній платформі, використовуючи синьо-фіолетовий світлофільтр. Видно, що уривок о. У клітинах, пофарбованих флуоресцентним барвником 01% акридинового оранжевого, ядро та цитоплазма збуджені, виробляючи два різні кольори флуоресценції (темно-зелений і оранжево-червоний).
