Основи та елементи конструкції флуоресцентного мікроскопа
Флуоресцентна мікроскопія використовує точку з високою ефективністю світла для випромінювання світла певної довжини хвилі (наприклад, ультрафіолетового світла 3650 дюймів або фіолетового синього світла 4200 дюймів) через систему фільтрів як збуджуючого світла для збудження флуоресцентних речовин у зразку для випромінювання флуоресценції. різні кольори. Після цього спостерігайте через збільшення лінзи об’єктива та окуляра. Таким чином, під сильним контрастним фоном, навіть якщо флуоресценція дуже слабка, його легко ідентифікувати та він має високу чутливість. В основному він використовується для дослідження структури та функції клітини та хімічного складу. Основна структура флуоресцентного мікроскопа складається зі звичайного оптичного мікроскопа та деяких аксесуарів (таких як флуоресцентне джерело світла, фільтр збудження, двоколірний світлорозділювач і блокуючий фільтр тощо). Флуоресцентне джерело світла — зазвичай використовують ртутну лампу надвисокого тиску (50-200 Вт), яка може випромінювати світло з різною довжиною хвилі, але кожна флуоресцентна речовина має довжину хвилі збудження, яка створює найсильнішу флуоресценцію, тому фільтр збудження (загалом, існують ультрафіолетові, фіолетові, сині та зелені фільтри збудження), які пропускають світло збудження лише певної довжини хвилі та опромінюють зразок, поглинаючи інше світло. Після того, як кожна речовина опромінюється збуджуючим світлом, вона випромінює видиму флуоресценцію з довшою довжиною хвилі, ніж довжина хвилі опромінення, за дуже короткий час. Флуоресценція є специфічною і зазвичай слабшою, ніж світло збудження. Щоб спостерігати специфічну флуоресценцію, необхідно додати блокування (або придушення) за лінзою об’єктива та використовувати разом із нею.
Відмінність флуоресцентного мікроскопа від звичайного мікроскопа
1. Спосіб освітлення зазвичай епіскопічний, тобто джерело світла проектується на зразок через об'єктив;
2. Джерелом світла є ультрафіолетове світло, довжина хвилі коротша, а роздільна здатність вища, ніж у звичайних мікроскопів;
3. Існує два спеціальні фільтри: один перед джерелом світла використовується для фільтрації видимого світла, а фільтр між окуляром і лінзою об’єктива використовується для фільтрації ультрафіолетових променів для захисту людського ока.
Флуоресцентний мікроскоп також є різновидом оптичного мікроскопа, основна відмінність полягає в тому, що довжина хвилі збудження у двох різна. Це визначає різницю між флуоресцентним мікроскопом і звичайним оптичним мікроскопом з точки зору конструкції та використання.
Флуоресцентна мікроскопія є важливим інструментом імунофлуоресцентної цитохімії. Він складається з основних компонентів, таких як джерело світла, система фільтрів та оптична система. Це використання певної довжини хвилі світла для збудження зразка для випромінювання флуоресценції та спостереження за флуоресцентним зображенням зразка шляхом посилення лінз об’єктива та системи окулярів.
