Різниця між двофотонною мікроскопією та лазерною конфокальною мікроскопією
Лазерний конфокальний мікроскоп - це набір систем спостереження, аналізу та виведення, які використовують лазер як джерело світла, принцип сполученого фокусування та пристрій на основі традиційного оптичного мікроскопа та цифрову обробку зображень спостережуваного об'єкта за допомогою комп'ютера. Основні системи включають лазерні джерела світла, автоматичні мікроскопи, скануючі модулі (включаючи конфокальні канали оптичного тракту та точкові отвори, скануючі дзеркала, детектори), процесори цифрових сигналів, комп’ютери та пристрої виведення зображення (дисплеї, кольорові принтери). Використовуючи лазерний скануючий конфокальний мікроскоп, можна виконати томографію та візуалізацію досліджуваного зразка. Таким чином, можна спостерігати і аналізувати тривимірну просторову структуру клітин без пошкоджень.
У той же час лазерна скануюча конфокальна мікроскопія також є потужним інструментом для динамічного спостереження за живими клітинами, багаторазового імунофлуоресцентного мічення та іонно-флуоресцентного мічення. Він точно аналізує суть спектра та розрізняє сигнали від різних міток із спектрами випромінювання, що сильно перекриваються.
Найважливішим є те, що для багатоколірного флуоресцентного фарбування можна повністю усунути вплив флуоресцентних перехресних перешкод, мінімізуючи при цьому втрату флуоресцентного сигналу зразка. Це все те, чого не досягають звичайні дзеркала.
Співвідношення фокусної відстані між об’єктивом мікроскопа та окуляром
Різні принципи
1. Флуоресцентний мікроскоп: він використовує ультрафіолетове світло як джерело світла для освітлення досліджуваного об’єкта, змушуючи його випромінювати флуоресценцію, а потім спостерігати за формою та положенням об’єкта під мікроскопом.
2. Лазерний конфокальний мікроскоп: на основі зображень флуоресцентної мікроскопії встановлюється лазерний скануючий пристрій для збудження флуоресцентних зондів за допомогою ультрафіолетового або видимого світла.
Різні характеристики
1. Флуоресцентний мікроскоп: використовується для вивчення поглинання, транспортування, розподілу та локалізації речовин у клітинах. Деякі речовини в клітинах, наприклад хлорофіл, можуть випромінювати флуоресценцію після впливу ультрафіолетового випромінювання; Деякі речовини самі по собі можуть не випромінювати флуоресценцію, але якщо їх пофарбувати флуоресцентними барвниками або флуоресцентними антитілами, вони також можуть випромінювати флуоресценцію під ультрафіолетовим випромінюванням.
2. Лазерний конфокальний мікроскоп: використання комп’ютера для обробки зображень для отримання флуоресцентних зображень внутрішньої мікроструктури клітин або тканин, а також для спостереження фізіологічних сигналів, таких як Ca2+, значення рН, потенціал мембрани та зміни морфології клітин на субклітинному рівні.
