Методи спостереження за допомогою оптичної мікроскопії
Оптичний мікроскоп — це оптичний прилад, який використовує світло як джерело світла для збільшення та спостереження за крихітними структурами, невидимими неозброєним оком. Перший мікроскоп був виготовлений оптиком у 1604 році.
За останні два десятиліття вчені виявили, що оптичні мікроскопи можна використовувати для виявлення, відстеження та зображення об’єктів, менших за половину довжини хвилі звичайного видимого світла або кілька сотень нанометрів.
Оскільки світлові мікроскопи традиційно не використовувалися для вивчення нанорозміру, їм часто не вистачає каліброваного порівняння зі стандартом, щоб перевірити правильність результатів для точної інформації в цьому масштабі. Мікроскопія може точно й послідовно вказати одне й те саме розташування однієї молекули чи наночастинки. У той же час, однак, це може бути дуже неточним, і положення об’єкта, ідентифікованого мікроскопом з точністю до мільярдної частки метра, насправді може бути в межах мільйонної частки метра, оскільки немає помилки.
Оптичні мікроскопи поширені серед лабораторних інструментів і можуть легко збільшувати різні зразки, починаючи від делікатних біологічних зразків і закінчуючи електричними та механічними пристроями. Подібним чином оптичні мікроскопи стають дедалі потужнішими та доступнішими, оскільки вони поєднують наукову версію освітлення та камер у вашому смартфоні.
Загальні методи спостереження оптичної мікроскопії
Метод спостереження диференційної інтерференції (DIC).
принцип
Поляризоване світло розкладається на взаємно перпендикулярні та однакові за інтенсивністю пучки через спеціальну призму, і промені проходять через об’єкт у двох дуже близьких точках (менше роздільної здатності мікроскопа), так що є невелика різниця у фазі, створення тривимірного зображення Тривимірне відчуття.
особливості
Це може змусити об’єкт, що перевіряється, створювати тривимірний стереоскопічний ефект, а ефект спостереження стає більш інтуїтивно зрозумілим. Спеціальний об’єктив не потрібен, він краще працює з флуоресцентним спостереженням і може регулювати зміни кольору фону та об’єктів для досягнення бажаного ефекту.
метод спостереження темного поля
Darkfield – це фактично освітлення темного поля. Його характеристики відрізняються від характеристик світлого поля. Він не спостерігає безпосередньо світло освітлення, але спостерігає світло, відбите або дифраговане об’єктом, що перевіряється. Таким чином, поле зору є темним фоном, а досліджуваний об'єкт являє собою світле зображення.
Принцип темного поля заснований на явищі Тиндаля в оптиці. Коли пил потрапляє прямо під сильне світло, людське око не може спостерігати його, що спричинено дифракцією сильного світла. Якщо на неї кинути світло похило, то внаслідок відбиття світла частинка ніби збільшується в розмірах і стає видимою для людського ока. Спеціальним аксесуаром, необхідним для спостереження в темному полі, є темнопольний конденсор. Його характеристика полягає в тому, що він не дозволяє світловому променю проходити крізь об’єкт знизу вгору, але змінює шлях світла таким чином, щоб воно стріляло похило до об’єкта, так що освітлююче світло не потрапляє безпосередньо в лінзу об’єктива, і використовує відбиття або дифракцію світла, утвореного поверхнею об’єкта Яскраве зображення. Роздільна здатність спостереження в темному полі набагато вища, ніж у світлому полі, досягаючи 0.02-0.004 мкм.
