Методи та етапи обробки зразків для електронної мікроскопії
Перед використанням трансмісійного електронного мікроскопа для спостереження за біологічними зразками, зразки повинні бути попередньо оброблені. Науковці використовують різні методи обробки відповідно до потреб різних досліджень.
Фіксація: щоб якомога більше зберегти зразок, глутаровий альдегід використовується для твердіння зразка, а осмієва кислота використовується для фарбування жиру.
Холодна фіксація: зразок швидко заморожується в рідкому етані, щоб вода не кристалізувалась і натомість утворювала аморфний лід. Зразки, збережені таким чином, мають менше пошкоджень, але контрастність зображення дуже низька.
Зневоднення: замість води використовуйте етанол і ацетон.
Доповнений: зразок можна розділити після доповнення.
Сегментація: зразок нарізають на тонкі скибочки за допомогою алмазного леза.
Забарвлення: важкі атоми, такі як свинець або уран, розсіюють електрони сильніше, ніж легші атоми, і тому їх можна використовувати для збільшення контрасту.
Перш ніж використовувати трансмісійний електронний мікроскоп для спостереження за металами, зразок необхідно перевірити
Віруси під електронним мікроскопом
Розрізання на дуже тонкі скибочки (приблизно 0,1 мм) і подальше електролітичне полірування для продовження потоншення металу часто призводять до утворення отвору в центрі зразка, через який електрони можуть проходити крізь дуже тонкий метал. Метали, які не можна полірувати електролітично, або матеріали, які не є електропровідними або мають низьку електропровідність, наприклад кремній, зазвичай розріджують механічно, а потім обробляють за допомогою іонного удару. Щоб запобігти накопиченню статичної електрики в непровідних зразках у скануючому електронному мікроскопі, їх поверхні повинні бути покриті провідним шаром.
Чому електронні мікроскопи мають вищу роздільну здатність?
Як випливає з назви, так званий електронний мікроскоп — це мікроскоп, який використовує електронні пучки як джерело освітлення. Оскільки електронний промінь може згинатися під дією зовнішнього магнітного або електричного поля, утворюючи явище заломлення, подібне до явища заломлення видимого світла, що проходить через скло, ми можемо використати цей фізичний ефект для створення «лінзи» для електронного променя, таким чином розробка електронного мікроскопа. Характеристика просвічуючого електронного мікроскопа (ТЕМ) полягає в тому, що ми використовуємо електронні промені, які проходять крізь зразок до зображення, що відрізняється від скануючого електронного мікроскопа (скануючий електронний мікроскоп, СЕМ). Оскільки довжина хвилі електронів набагато менша за довжину хвилі видимого світла (довжина хвилі електронів 100кВ дорівнює 0,0037 нм, тоді як довжина хвилі фіолетового світла становить 400 нм), відповідно до оптичних Згідно теорії, можна очікувати, що роздільна здатність електронних мікроскопів буде набагато кращою, ніж оптичних мікроскопів. Насправді роздільна здатність сучасних електронних мікроскопів досягла 0,1 нм. У підручнику для факультативу з фізики для старшокласників це пояснюється більш детально (невелика інформація про фотоефект)
