Вимоги до підготовки предметних стекол люмінесцентного мікроскопа
(1) Предметне скло
Товщина предметного скла має бути від 0,8 до 1,2 мм. Якщо предметне скло занадто товсте, з одного боку, воно буде поглинати більше світла, а з іншого боку, воно не дозволить збуджуючому світлу зібратися на зразку. Предметне скло має бути гладким, однаковою за товщиною та не мати явної спонтанної флуоресценції. Іноді потрібні предметні скла з кварцового скла.
(2) Покривне предметне скло
Товщина покривного скла становить близько 0,17 мм, і воно гладке. Для посилення збуджуючого світла також можна використовувати інтерференційне покривне скло. Це спеціально розроблене покривне скло з декількома шарами речовин (наприклад, фториду магнію), які по-різному впливають на світло різних довжин хвиль. Це може дозволити флуоресценції проходити плавно, тоді як світло збудження відбиття може збудити зразок.
(3) Зразок
Зрізи тканин або інші зразки не повинні бути надто товстими. Якщо вони занадто товсті, більша частина збуджувального світла споживається в нижній частині зразка, тоді як верхня частина, яку безпосередньо спостерігає лінза об’єктива, збуджується не повністю. Крім того, перекриття клітин або маскування домішок можуть вплинути на судження.
(4) Герметик
В якості кріпильного агента зазвичай використовується гліцерин, який не повинен мати спонтанної флуоресценції, бути безбарвним і прозорим. Яскравість флуоресценції є відносно яскравою при pH 8.5-9.5, і її непросто швидко згаснути. Тому рівномірна суміш гліцерину та 0.5mol/l карбонатного буфера з pH 9.0-9.5 зазвичай використовується як герметизуючий агент.
(5) Дзеркальне масло
При використанні флуоресцентного мікроскопа в темному полі та масляного мікроскопа для спостереження за зразками необхідно використовувати дзеркало. Можна використовувати спеціальну нефлуоресцентну олію для дзеркал або замість неї можна використовувати гліцерин. Також можна використовувати рідкий парафін, але показник заломлення низький і незначно впливає на якість зображення.
