Правильне використання інвертованого флуоресцентного мікроскопа
Інвертований флуоресцентний мікроскоп — це багатофункціональний мікроскоп, який використовується в галузі високоякісних біологічних наукових досліджень. Його структура складна і дорога. Тому, щоб аспіранти-медики могли правильно зрозуміти роботу та використання інвертованого флуоресцентного мікроскопа, викладачі повинні спочатку продемонструвати фактичну роботу інвертованого флуоресцентного мікроскопа. Раніше було створено курс для вивчення базових знань про інвертовані флуоресцентні мікроскопи, знайомство зі структурою, принципом, функціями та основними методами використання інвертованих флуоресцентних мікроскопів, а потім у конкретних операціях для різних зразків демонстрували різні функції, починаючи з неглибоких глибоко, поступово. Стандартизувати використання інвертованих флуоресцентних мікроскопів студентами-медиками.
1. Правильне використання світлого поля спостереження. Однією з функцій інвертованого флуоресцентного мікроскопа є спостереження світлого поля. Основний принцип полягає в тому, що після того, як зразок опромінюється світлом, поглинання світла кожної частини є різним, щоб отримати зображення на яскравому фоні. В основному підходить для пофарбованих або пофарбованих клітин, спостереження за зразками, наприклад зрізами тканин.
2. Правильне використання фазово-контрастного спостереження. Другою функцією інвертованого флуоресцентного мікроскопа є спостереження за фазовим контрастом. Його основний принцип полягає в перетворенні оптичної різниці ходу різних частин зразка в різницю амплітуд. Спостереження здійснюється через фазово-контрастний об'єктив з фазовою пластинкою і збиральну лінзу з кільцевою діафрагмою. Це в основному застосовується до Для спостереження за живими клітинами або незабарвленими зрізами тканин у процесі експериментального навчання, крім правильного керівництва аспірантами-медиками щодо спостереження за основними методами роботи фазово-контрастного спостереження, важливіше направляти їх до розуміти та освоювати зразки, які використовуються для спостереження за фазовим контрастом. Для них мікроскопічне спостереження культивованих клітин є найбільш часто використовуваним у майбутніх наукових дослідженнях. Перш за все, для вибору обладнання клітин зазвичай рекомендується використовувати скляні та пластикові культуральні чашки, культуральні пластини та культуральні пляшки. Більшість з них безбарвні та прозорі, і їх можна спостерігати безпосередньо в інвертований флуоресцентний мікроскоп без зливання клітинної рідини та інших процедур. По-друге, під час мікроскопічного спостереження не відкривайте самовільно кришку обладнання, щоб не забруднити клітини. Нарешті, оператори повинні носити рукавички, маски та білі халати, які можуть не лише захистити їх власне здоров’я, але й запобігти забрудненню клітин.
3. Правильне використання флуоресцентного спостереження. Третьою функцією інвертованого флуоресцентного мікроскопа є спостереження за флуоресценцією. Основний принцип полягає у використанні збуджуючого світла для збудження зразка для генерації флуоресценції, щоб реалізувати спостереження за формою та положенням зразка. Він в основному підходить для спостереження флуоресцентно мічених зразків. Спостереження за флуоресценцією є важливою функцією інвертованого флуоресцентного мікроскопа, а його аксесуари є дорогими та особливими у використанні. Для того, щоб аспіранти-медики правильно зрозуміли роботу та використання флуоресцентного спостереження, викладачі повинні не лише навчити їх основним методам роботи, але, що більш важливо, навчити їх оволодіти його особливостями. Перш за все, під час підготовки зразків предметне скло та покривне скло повинні мати гладку поверхню та відповідну товщину (предметне скло має бути від 0.8 мм до 1,2 мм, а покривне скло — приблизно { {5}}.17 мм); зразок повинен мати відповідну товщину та уникати перекривання клітин або маскування домішками; монтажне середовище має використовувати рівний об’єм суміші гліцерину та карбонатного буфера (0.5mol/L pH9.0-9.5). По-друге, перед флуоресцентним спостереженням слід вимкнути електричне світло в кімнаті та біле світло інвертованого флуоресцентного мікроскопа, щоб забезпечити середовище в темній кімнаті. Нарешті, у спостереженні за флуоресценцією слід суворо контролювати час спостереження, зазвичай підходить 1-2 годин/час, інакше флуоресценція ослабне та зникне; регулюючи джерело світла, одягайте захисні окуляри, щоб уникнути пошкодження ультрафіолетових променів на окулярах.
4. Правильне використання захоплення зображення. У наукових дослідженнях потрібно не тільки, щоб інвертований флуоресцентний мікроскоп міг здійснювати різні спостереження, але також вимагає, щоб інвертований флуоресцентний мікроскоп міг здійснювати захоплення зображень. Система інвертованого флуоресцентного мікроскопа поєднує оптичний мікроскоп із комп’ютером за допомогою фотоелектричного перетворення не лише для мікроскопічного спостереження в окулярі, але й для динамічного спостереження в реальному часі, редагування та збереження на комп’ютері.
