Принципи визначення розміру клітини під мікроскопом
Розмір мікробної клітини є однією з важливих основ для класифікації та ідентифікації мікроорганізмів. Мікроорганізми крихітні, і їх необхідно спостерігати за допомогою мікроскопа. Для вимірювання розмірів мікробних клітин їх також необхідно виміряти під мікроскопом за допомогою спеціального мікрометра.
Мікрометр мікроскопа складається з двох частин: столичного мікрометра та окулярного мікрометра.
Предметний мікрометр являє собою предметне скло з гравіюванням у центрі (рис. 2-7). Загальна довжина луски 1 мм.
Призначений для калібрування окулярних мікрометрів. Окулярний мікрометр можна використовувати безпосередньо для вимірювання розміру комірки. Це предметне скло круглої форми (рис. 2-8) з рівним поділом у центрі, яке розміщується на роздільнику в окулярі для вимірювання. Загальна довжина шкали мікрометра окуляра становить 1 см, вона поділена на 100 дрібних комірок, кожна з яких має довжину 100 мкм. Оскільки окулярний мікрометр вимірює розмір зображення мікробних клітин після збільшення за допомогою мікроскопа, фактична шкала представляє довжину. Він змінюється залежно від збільшення використовуваного окуляра та лінзи об’єктива, а також довжини оправи об’єктива. Тому його необхідно відкалібрувати за допомогою предметного мікрометра перед використанням, щоб визначити довжину, представлену кожною маленькою коміркою мікрометра окуляра під певним збільшенням. , а потім за допомогою окулярного мікрометра безпосередньо виміряйте розмір вимірюваного об’єкта.
Розрахунок коефіцієнта калібрування для мікрометра окуляра: шкала мікрометра окуляра (μ=відома відстань між лініями подвійного перекриття на мікрометрі столика / лінія подвійного перекриття м) між шкалою мікрометрів окуляра лінійки
Приклад 1: Якщо відома відстань між двома лініями, що перекриваються, становить 2 ступеневих мікрометричних шкал (2 X 10 мкм
м), що відповідає 13 мікрометричним шкалам окуляра, тоді
Поправочний коефіцієнт для кожної шкали мікрометра окуляра=20 мкм / 13=1,54 мкм
Приклад 2: Якщо мікроорганізм спостерігати за допомогою окуляра мікрометра мікроскопа з довжиною 5 мікрометричних шкал окуляра, то
Мікробна довжина=кількість поділок, виміряна окулярним мікрометром X поправковий коефіцієнт для кожної поділки окулярного мікрометра=5 X 1,54 мкм=7,70 мкм
