Переваги та недоліки багатофотонної лазерної скануючої мікроскопії
Багатофотонна лазерна скануюча мікроскопія — це експериментальний метод, заснований на технології лазерної скануючої мікроскопії, яка забезпечує точніші можливості оптичного розрізу в 3D-перегляді. Метод збудження багатофотонної флуоресценції використовує довгі хвилі червоного або ближнього інфрачервоного світла для отримання флуоресцентних зображень зразків високої роздільної здатності з мінімальним знищенням активних зразків, що робить його придатним для зображення живих клітин, особливо товстих живих тканин, таких як шматочки мозку, ембріони, цілі органи і навіть цілі організми.
Переваги наступні:
1, використання збудження червоного світла або інфрачервоного світла, розсіювання світла невелике (розсіювання дрібних частинок і довжина хвилі четвертого ступеня зворотного співвідношення).
2, не потребує пінхолу, може збирати більше розсіяних фотонів із поперечного перерізу зображення.
3, обскура не може розрізнити розсіяні фотони, випромінювані нефокусною областю або фокальною областю, багатофотонне співвідношення сигнал/шум глибокого зображення є хорошим.
4, однофотонне збудження ультрафіолетового або видимого світла, що використовується в пучку для досягнення фокальної площини, перш ніж зразок легко поглинається та ослаблюється, нелегко глибоке збудження.
5, при спостереженні під біологічним мікроскопом, * перше, щоб не пошкодити активний стан самого організму, підтримувати воду, концентрацію іонів, циркуляцію кисню та поживних речовин. У випадках спостереження за світлом як теплова, так і фотонна енергія повинні залишатися в клітині без шкоди для кількості випромінювання, світлової енергії.
6, багатофотонний мікроскоп також має багато переваг. Такі як тривимірна роздільна здатність, проникнення в глибину, ефективність розсіювання, фонове освітлення, співвідношення сигнал/шум, контроль тощо, попередні лазерні мікроскопи не мають або мають непорівнянні характеристики.
Багатофотонний конфокальний лазерний скануючий мікроскоп був розширений для різних досліджень і галузей застосування. Він здатний до тривимірного неруйнівного спостереження зразків у їхньому природному стані та може покращити роздільну здатність і співвідношення сигнал/шум системи. Використовуючи зміну властивостей матеріалу після багатофотонного збудження, також можна досягти тривимірного зберігання даних висоти та тривимірного мікровиробництва в будь-якому напрямку, що має високу прикладну цінність. Можна вважати, що з подальшим розвитком машин, матеріалів, лазерних технологій та інших технологій, пов’язаних із багатофотонною конфокальною мікроскопією, багатофотонний конфокальний лазерний скануючий мікроскоп отримає більший розвиток і ширше застосування.
Недоліки наступні:
1, тільки флуоресцентне зображення.
2, якщо зразок містить хромофори, які можуть поглинати світло збудження, наприклад пігменти, зразок може бути термічно пошкоджений.
3, роздільна здатність трохи зменшується, хоча її можна покращити шляхом одночасного використання конфокальної апертури, але буде втрата сигналу.
4. Вартість багатофотонної скануючої мікроскопії є високою через обмеження дорогих надшвидких лазерів.
