Спосіб виготовлення мікроскопічних предметних стекол
Існує три способи виготовлення предметних стекол:
1. Метод мазка
Мазковий метод – це спосіб підготовки, при якому матеріал рівномірно розподіляється на предметному склі.
До матеріалів мазка входять одноклітинні організми, дрібні водорості, кров, бактеріальні культури, пухкі тканини рослин і тварин, сім’яні гнізда, пиляки тощо.
При намазуванні слід звернути увагу на:
(1) Скло має бути чистим.
(2) Скло слід тримати рівно.
3) Покриття має бути рівномірним. Нанесіть краплю рідини для покриття праворуч від центру предметного скла та добре розподіліть її лезом препарувального ножа або зубочисткою тощо.
4) Покриття має бути тонким. Використовуйте інше предметне скло як штовхач, обережно проштовхніть справа наліво по поверхні предметного скла з краплею розчину для нанесення (кут між двома предметними скельцями має бути від 30 до 45 градусів) і нанесіть рівномірно тонкий шар.
5) Фіксація. Якщо необхідна фіксація, використовуйте хімічний фіксатор або десикаційну (бактеріальну) фіксацію.
6) Фарбування. Використовуйте метиленовий синій для бактерій і пляму Рейчел для крові. Фарбувальний розчин повинен покрити всю покриту поверхню.
7) Промити. Розберіть на абсорбуючому папері або висушіть.
8) Заклейте плівкою. Для тривалого зберігання використовуйте плівку з канадського дерева.
2. Метод плівкового пресування
Метод плівки під тиском — це біологічний матеріал, який поміщають між предметним склом і покривним листом, застосовуючи певний тиск, клітини тканини розтискаються один від одного. Метод підготовки.
(1) взяти матеріал. Спостереження за поділом клітин, як матеріали для поділу клітин слід вибирати рясні свіжі клітини тканини. Такі як кінчики коренів, меристематична тканина кінчика стебла, клітини кісткового мозку, пиляки (материнські клітини пилку). Насіннєве гніздо (сперматогонії) тощо.
(2) Фіксація. Фіксація матеріалу може бути визначена відповідно до потреби, одразу після спостереження за плівкою тиску матеріалу, не можна проводити окрему фіксовану обробку (і синхронне фарбування); брати матеріал не відразу після огляду, матеріал можна зафіксувати фіксатором (зазвичай спиртоацетатним фіксатором). Виправлено 2 ~ 24 години (залежно від матеріалу) після промивання 95% етанолом, збережено в 70% етанолі, режим очікування.
(3) Дисоціація. Клітини важко диспергувати матеріал розчином для гідролізу (наприклад, 1N HCl або розчином соляної кислоти та спирту), загальна обробка 6 ~ 20 хвилин після дисоціації та промивання водою перед фарбуванням.
(4) Фарбування. Існує багато видів плям. Спостереження за хромосомами зазвичай використовується для фарбування розчином пурпурового ацетату.
(5) Пресування плівки. Помістіть матеріал на предметне скло, додайте краплю води або фарбувального розчину, накрийте накривне скельце та обережно натисніть на предметне скло великим пальцем.
(6) Спостереження. Після пресування плівки її можна спостерігати під мікроскопом.
