Покращені переваги лазерного скануючого багатофотонного мікроскопа
Лазерний скануючий багатофотонний мікроскоп є важливим удосконаленням оптичного мікроскопа, який головним чином показує, що він може спостерігати глибоку структуру живих клітин, фіксованих клітин і тканин, а також може отримати чітку та різку багатошарову структуру Z-площини, тобто оптичні зрізи , за допомогою якого можна побудувати тривимірну суцільну структуру зразків. Конфокальний мікроскоп використовує лазерне джерело світла, яке заповнює всю задню фокальну площину лінзи об’єктива після розширення, а потім проходить через систему лінз об’єктива, щоб сходитися в дуже маленькі точки на фокальній площині зразка. Відповідно до числової апертури лінзи об’єктива діаметр найяскравішої точки освітлення становить близько 0.25 ~ 0.8 мкм, а глибина — приблизно 0.5 ~ 1.5 мкм .. Розмір фокусу кополімеризації залежить від конструкції мікроскопа, довжини хвилі лазера, характеристик лінзи об’єктива, налаштування стану скануючого блоку та властивостей зразка. Діапазон освітлення та глибина різкості мікроскопа дуже великі, тоді як освітлення конфокального мікроскопа зосереджено на * * фокусі на фокальній площині. Основна перевага конфокального мікроскопа полягає в тому, що він може робити тонкі оптичні зрізи товстих флуоресцентних зразків (які можуть досягати 5 0 мкм або більше), а товщина зрізів становить приблизно від 0,5 до 1,5 мкм. Серію зображень оптичних зрізів можна отримати, переміщуючи зразок вгору та вниз за допомогою крокового двигуна мікроскопа по осі Z. Отримання інформації про зображення контролюється в першій площині і не буде порушено сигналами з інших місць на зразку. Після усунення впливу фонової флуоресценції та збільшення відношення сигнал/шум контраст і роздільна здатність конфокального зображення очевидно покращуються порівняно з традиційним флуоресцентним зображенням із польовим освітленням. У багатьох зразках багато складних структурних компонентів переплітаються, утворюючи складну систему, але як тільки вдається зібрати достатню кількість оптичних зрізів, ми можемо реконструювати їх у трьох вимірах за допомогою програмного забезпечення. Цей експериментальний метод широко використовувався в біологічних дослідженнях для з'ясування складних структурних і функціональних зв'язків між клітинами або тканинами.
