Як вибрати між інвертованим мікроскопом і флуоресцентним мікроскопом?
У клітинних культурах і пов’язаних з ними похідних експериментах мікроскоп є дуже важливим інструментом. В даний час на ринку представлені різні типи мікроскопів. Складно вибрати мікроскоп, який відповідає потребам і придатний для застосування. Нижче наведено вступ до принципів роботи інвертованих мікроскопів і флуоресцентних мікроскопів, щоб ви могли легко вибрати.
Композиція інвертованого мікроскопа така ж, як і звичайного мікроскопа, в основному включає три частини: механічну частину, освітлювальну частину та оптичну частину. Композиція інвертованого мікроскопа така ж, як і звичайного вертикального мікроскопа, за винятком того, що лінза об’єктива та система освітлення перевернуті: перша знаходиться під предметним столиком, а друга – над предметним столиком. Така конструкція може значно збільшити ефективну відстань між системою концентрації освітлення та предметним столиком, що зручно для розміщення більш товстих об’єктів для спостереження, таких як культуральні чашки та пляшки з клітинними культурами (звичайно, предметні скла тощо також доступні) , і в той же час відстань між лінзою об'єктива і матеріалом Робоча відстань між ними не повинна бути дуже великою. Інвертовані мікроскопи використовуються для спостереження за мікроорганізмами, клітинами, бактеріями, культурою тканин, суспензіями, осадами тощо в лікувально-оздоровчих установах, вищих навчальних закладах, науково-дослідних інститутах. Він може безперервно спостерігати за процесом розмноження та поділу клітин, бактерій тощо в культуральному середовищі та робити фотографії будь-якої форми в процесі. Він широко використовується в цитології, паразитології, онкології, імунології, генній інженерії, промисловій мікробіології, ботаніці та інших галузях.
Флуоресцентна мікроскопія використовується для вивчення поглинання та транспортування речовин у клітинах, розподілу та локалізації хімічних речовин тощо. Для досліджуваного об’єкта існує два способи генерації флуоресценції: автофлуоресценція, яка випромінює флуоресценцію безпосередньо після опромінення ультрафіолетом. світло; Деякі речовини в клітинах, наприклад хлорофіл, виробляють автофлуоресценцію після опромінення ультрафіолетовими променями; хоча деякі речовини самі по собі не можуть флуоресцувати, вони також можуть випромінювати вторинну флуоресценцію після фарбування флуоресцентними барвниками або флуоресцентними антитілами після опромінення ультрафіолетовими променями. Флуоресцентний мікроскоп використовує точкове джерело світла з високою ефективністю світла для випромінювання світла певної довжини хвилі (ультрафіолетове світло 365 нм або фіолетове синє світло 420 нм) через систему фільтрів як світло збудження, а після збудження флуоресцентних речовин у зразку випромінює флуоресценцію різних кольорів, то Спостереження ведеться через збільшення об’єктива та окуляра. Таким чином, під сильним контрастним фоном, навіть якщо флуоресценція дуже слабка, його легко ідентифікувати та він має високу чутливість. В основному він використовується для дослідження структури та функції клітини та хімічного складу.
Флуоресцентні мікроскопи поділяються на трансмісійні та епіежекційні, причому перший є більш примітивним, а другий – більш досконалим. Основна структура обох типів флуоресцентних мікроскопів подібна, головна відмінність полягає в тому, що збудливе світло пропускного типу проходить через зразок, і весь зразок генерує флуоресценцію, яка потім потрапляє в лінзу об’єктива. Чим вище збільшення, тим слабша флуоресценція; збуджуюче світло епіемісійного типу проектується на поверхню зразка, поверхня зразка створює флуоресценцію, і флуоресценція знову потрапляє в лінзу об’єктива. Чим вище збільшення, тим сильніша флуоресценція, яка підходить для спостереження з великим збільшенням. Основні компоненти флуоресцентного мікроскопа включають джерело світла ртутної лампи, пластину фільтра збудження, дихроїчне дзеркало (тип епізоду), пластину пресованого фільтра та конденсор темного поля (тип пропускання) тощо. Крім того, через сильне тепловиділення ртутних ламп, більшість з них також оснащені теплопоглинаючими фільтрами. Деякі флуоресцентні мікроскопи також мають фазово-контрастні об’єктиви та кільцеві діафрагми, тому можливі фазово-контрастні спостереження. Існують також флуоресцентні мікроскопи з інвертованою структурою, інший інвертований мікроскоп тощо.
Крім того, вищезазначені мікроскопи можна зібрати в цифровий мікроскоп, встановивши ПЗЗ, який перетворює фізичне зображення, яке бачить мікроскоп, у зображення на комп’ютері за допомогою цифро-аналогового перетворення. Таким чином, ми можемо змінити дослідження на мікроскопічному полі від традиційного звичайного бінокулярного спостереження до відтворення на дисплеї, тим самим покращуючи ефективність роботи.
