Навички та методи флуоресцентної мікроскопії
Технічні параметри флуоресцентного мікроскопа 1. Ширококутний окуляр 2. Ахроматична лінза об’єктива 3. Конвертер об’єктива з чотирма отворами 4. Епіфлуоресцентний пристрій Синя (B) Зелена (G) система збудження 100 Вт ртутна лампа 5. Коаксіальний грубий і точний механізм регулювання фокуса: Налаштувати Діапазон фокусування: 15 мм Значення сітки мікропереміщення: 0,002 мм 6. Двошаровий механічний стіл Діапазон поздовжнього переміщення: 70 мм Діапазон бічного переміщення: 50 мм
Технічні параметри флуоресцентного мікроскопа
1. Ширококутний окуляр
2. Ахроматична лінза об'єктива
3. Наконечник з чотирма апертурами
4. Епіфлуоресцентний пристрій синій (B) зелений (G) система збудження 100 Вт ртутна лампа
5. Коаксіальний грубий і точний механізм регулювання фокуса: діапазон фокусування 15 мм, значення сітки тонкого переміщення 0.002 мм
6. Двошаровий механічний верстак
Діапазон вертикального переміщення: 70 мм Діапазон бокового переміщення: 50 мм
Навички та методи флуоресцентної мікроскопії
(1) Предметне скло
Товщина предметного скла має бути від 0,8 до 1,2 мм. Занадто товсте предметне скло, з одного боку, поглинає більше світла, а з іншого боку, збудливе світло не може бути сконцентровано на зразку. Предметні скла мають бути гладкими, однакової товщини та без явної автофлуоресценції. Іноді використовують предметні скла з кварцового скла.
(2) Покривне скло
Товщина покривного скла становить приблизно 0,17 мм, гладке. Для посилення збуджуючого світла також можна використовувати інтерференційне покривне скло, яке є спеціальним покривним склом, покритим декількома шарами речовин (наприклад, фториду магнію), які мають різну інтерференційну дію на світло різних довжин хвиль, що може призвести до флуоресценція йде гладко. Збуджувальне світло проходить і відбивається, і це відбите збуджувальне світло збуджує зразок.
(3) Зразок
Зрізи тканин або інші зразки не повинні бути надто товстими. Якщо він занадто товстий, більша частина збуджувального світла буде споживатися в нижній частині зразка, тоді як верхня частина, яка безпосередньо спостерігатиметься лінзою об’єктива, не збуджуватиметься повністю. Крім того, на судження впливають перекриття комірок або забруднення.
(4) Монтажний засіб
Гліцерин зазвичай використовується як кріпильний агент, який не повинен мати автофлуоресценції, безбарвний і прозорий, а яскравість флуоресценції яскравіша при рН 8.5-9.5, і його непросто швидко згаснути. Тому рівномірна суміш гліцерину та 0.5mol/l карбонатного буферного розчину з pH від 90 до 9,5 зазвичай використовується як кріпильний агент.
(5) дзеркальна олія
Як правило, під час спостереження за зразками за допомогою темнопольних флуоресцентних мікроскопів і масляних іммерсійних лінз необхідно використовувати іммерсійну олію. Найкраще використовувати спеціальне нефлуоресцентне іммерсійне масло. Замість цього також можна використовувати вищезазначений гліцерин і рідкий парафін, але показник заломлення низький, що незначно впливає на якість зображення. Вплив.
