Флуоресцентні мікроскопи можна розділити на два типи відповідно до їхнього оптичного шляху.
1. Просвічуючий флуоресцентний мікроскоп: джерело збуджуючого світла використовується для збудження флуоресценції шляхом проходження матеріалу зразка через конденсорну лінзу. Також можна використовувати звичайні концентратори темного поля, а звичайні концентратори можна використовувати для налаштування рефлектора для перенаправлення та бокового спрямування збуджуючого світла на зразок. Це відносно старомодний-флуоресцентний мікроскоп. Його перевагою є сильна флуоресценція при малому збільшенні, але його недоліком є те, що його флуоресценція зменшується зі збільшенням збільшення. Тому це краще для спостереження за більшими матеріалами зразків.
2. Флуоресцентний мікроскоп падаючого світла — це новий тип флуоресцентного мікроскопа, розроблений у наш час. На відміну від вищезазначеного, світло збудження падає від лінзи об’єктива вниз на поверхню зразка, використовуючи ту саму лінзу об’єктива, що й конденсор освітлення, і лінзу об’єктива для збору флуоресценції. Двоколірний розсіювач променя потрібно додати до оптичного шляху, який знаходиться на 45 градусів від легкого урану. Під кутом збудження світло відбивається в об'єктив і фокусується на зразку. Флуоресценція, що генерується зразком, а також світло збудження, відбите від поверхні лінзи об’єктива та покривного скла, потрапляють в лінзу об’єктива та повертаються до подвійного кольорового розсіювача променя, розділяючи світло збудження та флуоресценцію. Потім залишкове світло збудження поглинається блокуючим фільтром. Якщо використовуються різні комбінації фільтрів збудження/двокольорових сепараторів променів/блокувальних фільтрів, вони можуть задовольнити потреби різних флуоресцентних продуктів реакції. Перевагами цього флуоресцентного мікроскопа є рівномірне освітлення поля, чітке зображення та сильніша флуоресценція з більшим збільшенням.
(2) Інструкції з використання флуоресцентного мікроскопа.
1. Увімкніть джерело світла, ртутну лампу над-високого тиску потрібно попередньо нагріти протягом кількох хвилин, щоб досягти яскравої точки.
2. Просвічуюча флуоресцентна мікроскопія вимагає встановлення необхідного фільтра збудження між джерелом лампи та конденсором, а також відповідного блокуючого фільтра за лінзою об’єктива. Флуоресцентний мікроскоп падаючого світла повинен вставити необхідний фільтр збудження/подвійний світлорозділювач/блок блокуючого фільтра в слот оптичного шляху.
3. Спостерігайте за допомогою мало{1}}потужного мікроскопа та відрегулюйте центр джерела світла відповідно до пристрою налаштування різних типів флуоресцентних мікроскопів, щоб він знаходився в центрі всієї плями освітлення.
4. Розмістіть зразок і сфокусуйте його для спостереження. Слід звернути увагу під час використання: Не спостерігайте безпосередньо очима перед встановленням фільтра, щоб уникнути пошкодження очей; При дослідженні зразків за допомогою масляного мікроскопа слід використовувати спеціальний нефлуоресцентний масляний мікроскоп; Після-вимкнення ртутної лампи високого тиску її не можна одразу увімкнути знову. Перезапуск займає 5 хвилин, інакше він буде нестабільним і вплине на термін служби ртутної лампи.
(3) Спостерігаючи під флуоресцентним мікроскопом на навчальній платформі з використанням синьо-фіолетового світлофільтра, можна побачити клітини, пофарбовані 0,01% акридиновим оранжевим флуоресцентним барвником. Ядро і цитоплазма збуджені для створення двох різних кольорів флуоресценції (темно-зеленого і оранжево-червоного).
