Експериментальна методика методу прямого мікробіологічного мікроскопічного підрахунку
1. Розведення
Суспензія Saccharomyces cerevisiae для відповідного розведення, бактеріальна рідина, така як не густа, не може бути розведена.
2. Дзеркальний огляд лічильної камери
Перед додаванням зразків слід оглянути лічильну камеру лічильної пластини. Якщо є забруднення, їх потрібно очистити перед підрахунком.
3. Додавання зразка
Чисту та суху гематокритну пластинку накривають накривним скельцем, а потім асептичною бюреткою з тонким горлом розбавляють рідиною пивних дріжджів з краю накривного скельця (не має бути занадто багато), щоб бактеріальна рідина вздовж щілини шляхом капілярної інфільтрації в лічильна камера, загальна лічильна камера може бути заповнена бактеріальною рідиною. Зверніть увагу, щоб не було бульбашок повітря.
4. Рахунковий мікроскоп
Відпочивши протягом 5 хвилин, помістіть пластину для підрахунку крові на предметний столик мікроскопа, спочатку знайдіть розташування лічильної камери з малим збільшенням, а потім перейдіть на велике збільшення для підрахунку. Якщо перед підрахунком бактеріальна рідина виявилася надто густою або надто рідкою, перед підрахунком необхідно відкоригувати розведення. Як правило, для розведення зразка потрібно приблизно 5-10 організмів у кожній маленькій клітині. Для кожної лічильної камери підраховуються організми в 5 середніх відділеннях (можна вибрати 4 кути та центр середнього відділення). Бактерії, розташовані на лініях сітки, зазвичай підраховуються лише на верхній і правій лініях. У випадку брунькування дріжджів два організми враховуються, якщо тіло брунькування становить половину розміру батьківської клітини. Підрахунок зразка з двох лічильних камер для підрахунку значення для розрахунку вмісту бактерій у зразку.
5. Очищення гематокритної пластинки
Після використання пластину для підрахунку кров’яних тілець у водяній клітці промийте за допомогою водяного стовпа, не використовуйте тверді предмети для миття та чищення, мийте та висушуйте або сушіть феном. Огляньте пластину під мікроскопом і спостерігайте, чи немає залишкових організмів або інших опадів у кожному маленькому відділенні. Якщо він не чистий, прання потрібно повторювати, поки він не стане чистим.
