Прямий мікробіологічний мікроскопічний підрахунок
Прямий підрахунок під мікроскопом з використанням гематокритної пластини є широко використовуваним методом мікробного підрахунку. Перевага цього методу в тому, що він інтуїтивно зрозумілий і швидкий. Відповідним чином розведену бактеріальну суспензію (або суспензію спор) поміщають у лічильну камеру між предметним та покривним скельцями гематокритної пластини та підраховують під мікроскопом. Оскільки об’єм лічильної камери постійний (0,1 мм2), кількість мікроорганізмів, які спостерігаються під мікроскопом, можна перетворити на загальну кількість мікроорганізмів на одиницю об’єму. Цей метод також відомий як загальний підрахунок бактерій, оскільки він підраховує суму живих і мертвих організмів.
Гематокритна пластина, як правило, спеціальне предметне скло з трьома платформами, що складаються з чотирьох прорізів. Середня платформа поділена на дві половини короткою горизонтальною канавкою, кожна сторона платформи вигравірувана квадратною сіткою, кожна квадратна сітка поділена на дев’ять великих квадратів, середина великого квадрата, яка є лічильною камерою , мікробний підрахунок проводять у лічильній камері. Пластина для підрахунку крові показана на малюнку VIII-1.
Шкала лічильної камери, як правило, має два розміри: один великий квадрат поділений на 16 середніх квадратів, кожен з яких поділений на 25 малих квадратів (рис. VIII-2), а інший — великий квадрат розділений на 25 середніх квадратів, кожен з яких поділений на 16 малих квадратів (рис. VIII-1, C). Однак кількість малих квадратів у кожному великому квадраті однакова для будь-якого розміру лічильної дошки, тобто 16 × 25=400 малих квадратів, як на малюнку VIII-2.
Довжина сторони кожного великого квадрата дорівнює 1 мм, отже, площа кожного великого квадрата дорівнює 1 мм2, а після покриття покривним скельцем висота між предметним склом і покривним скельцем становить 0.1 мм, отже, об’єм скельця лічильної камери становить 0.1 мм3.
Під час підрахунку зазвичай підраховують загальну кількість бактерій у п’яти середніх квадратах, а потім отримують середнє значення кожного середнього квадрата, потім множать його на 16 або 25, щоб отримати загальну кількість бактерій в одному великому квадраті, а потім перетворюють його на загальна кількість бактерій в 1 мл розчину бактерій.
