Метод прямого підрахунку мікробних мікроскопів
Використання гемоцитометра для прямого підрахунку мікроорганізмів під мікроскопом є широко використовуваним методом підрахунку мікробів. Перевагою цього методу є його інтуїтивність і швидкість. Помістіть відповідним чином розведену бактеріальну суспензію (або суспензію спор) у лічильну камеру між предметним склом гемоцитометра та покривним скельним скельцем і підрахуйте під мікроскопом. Завдяки постійному об’єму лічильної кімнати (0,1 мм2), загальну кількість мікроорганізмів на одиницю об’єму можна конвертувати на основі кількості мікроорганізмів, які спостерігаються під мікроскопом. Через те, що цей метод обчислює суму живих і мертвих бактеріальних клітин, він також відомий як метод загального підрахунку бактерій.
Пластина для підрахунку клітин крові зазвичай являє собою спеціально розроблене предметне скло з чотирма борозенками, які утворюють три платформи. Середня платформа розділена навпіл короткою горизонтальною канавкою, а кожна сторона платформи вигравірувана сіткою. Кожна сітка поділена на дев'ять великих квадратів, і великий квадрат посередині є кімнатою для підрахунку, де проводиться мікробний підрахунок.
Загалом існують дві специфікації для масштабу лічильної кімнати. Перший полягає в тому, що великий квадрат ділиться на 16 середніх квадратів, а кожен середній квадрат далі ділиться на 25 малих квадратів (рис. VIII -2); Інший спосіб полягає в тому, щоб розділити великий квадрат на 25 середніх квадратів, і кожен середній квадрат далі розділити на 16 маленьких квадратів (рис. VIII -1, C). Але незалежно від розміру дошки для підрахунку кількість малих квадратів у кожному великому квадраті однакова, тобто 16 × 25=400 малих квадратів.
Якщо довжина сторони кожного великого квадрата дорівнює 1 мм, площа кожного великого квадрата дорівнює 1 мм2. Після накриття покривним склом висота між предметним склом і покривним склом становить 0,1 мм, тому об’єм лічильної кімнати становить 0,1 мм3.
При підрахунку зазвичай підраховують загальну кількість бактерій у п'яти квадратах, а потім отримують середнє значення кожного квадрата. Множення цього числа на 16 або 25 дає загальну кількість бактерій у великому квадраті, яке потім перетворюється на загальну кількість бактерій в 1 мл розчину бактерій.
