Загальні методи спостереження за допомогою оптичних мікроскопів
Світловий мікроскоп — це оптичний інструмент, який використовує світло як джерело для збільшення та спостереження за крихітними структурами, невидимими неозброєним оком. *Найперший мікроскоп був виготовлений оптиком у 1604 році.
За останні два десятиліття вчені виявили, що оптичні мікроскопи можна використовувати для виявлення, відстеження та зображення об’єктів, розмір яких менший за половину довжини хвилі звичайного видимого світла або кілька сотень нанометрів.
Оскільки оптичні мікроскопи традиційно не використовувалися для вивчення нанометрового масштабу, їм часто не вистачає каліброваних порівнянь зі стандартами, щоб перевірити, чи правильні результати для точної інформації в цьому масштабі. Мікроскоп може** постійно вказувати те саме положення окремої молекули чи наночастинки. Однак, у той же час, воно може бути дуже неточним, і положення об’єкта, ідентифікованого мікроскопом з точністю до мільярдної частки метра, насправді може бути мільйонною часткою метра, оскільки похибки немає.
Оптичні мікроскопи звичайні в лабораторних приладах і можуть легко збільшувати різні зразки, від делікатних біологічних зразків до електричних і механічних пристроїв. Подібним чином оптичні мікроскопи стають дедалі потужнішими та доступнішими, оскільки вони поєднують світло вашого смартфона з науковою версією відеокамери.
Загальні методи спостереження для оптичних мікроскопів
Метод спостереження диференційної інтерференції (DIC).
Принцип
Поляризоване світло розбивається на взаємно перпендикулярні пучки однакової інтенсивності за допомогою спеціальної призми. Промені проходять через досліджуваний об’єкт у двох дуже близьких точках (менших за роздільну здатність мікроскопа), таким чином дещо відрізняючись у фазі, надаючи зображенню стереоскопічне тривимірне відчуття.
Особливості
Може змусити досліджуваний об'єкт створювати тривимірні тривимірні відчуття, ефект спостереження є більш інтуїтивно зрозумілим. Спеціальний об’єктив не потрібен, і він краще працює з флуоресцентним спостереженням, а зміну кольору фону та об’єкта можна регулювати для досягнення бажаного ефекту.
Метод темного поля спостереження
Темне поле – це фактично освітлення темного поля. Воно відрізняється від яскравого поля тим, що воно безпосередньо спостерігає не освітлене світло, а світло, відбите або дифраговане від досліджуваного об’єкта. В результаті поле зору є темним фоном, а досліджуваний об'єкт представляє яскраве зображення.
Принцип темного поля зору ґрунтується на явищі Тіндаля в оптиці, коли дрібний пил не може спостерігатися людським оком у разі сильного прямого світла, що проходить через нього, що спричинено сильним світлом, спрямованим навколо нього. Якщо спрямувати на нього світло похило, частинки ніби збільшуються в розмірах за рахунок відбиття світла і стають видимими для людського ока. Спеціальним аксесуаром, необхідним для спостереження в темному полі, є світлозорна труба в темному полі. Він характеризується тим, що світловий промінь не пропускає крізь досліджуваний об’єкт знизу вгору, але змінює шлях світла таким чином, щоб він був спрямований похило до досліджуваного об’єкта, так що світло, що освітлює, не потрапляє безпосередньо в лінзу об’єктива. , а яскраве зображення формується за допомогою відбитого або дифрагованого світла від поверхні досліджуваного об'єкта. Роздільна здатність спостереження в темному полі набагато вища, ніж у світлому полі, досягаючи 0.02-0.004 мкм.
